第二代试管婴儿应称为卵母细胞胞浆内单精子注射。与第一代试管婴儿的区别主要是精子和卵子结合的方。第二代试管婴儿主要由于男方精子质量不好，所以胚胎学家从有限的精子中选取质量好的精子，然后通过超细的针，在显微镜的帮助下，人工将精子注射到卵子内。精子的来源可以是新鲜或冻融的精子，也可以是附睾、睾丸穿刺取出的精子。